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馬ELISA試劑盒檢測過程中出現的問題及解決辦法

發布時間:2021-11-26 點擊量:573

ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項

1. 加入反應終止液后,沒有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶標記物。
解決辦法:請按照操作步驟進行。
b.原因:試劑盒內容物未能充分回。
解決辦法:確定試劑盒內容物回溫后再進行操作。
c.原因:室溫太低。
解決辦法:若室溫太低(<19℃),請于操作步驟4,適當延長溫育時間。
d.原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。
解決辦法: 請用試劑盒內所提供的清洗液清洗。
e.原因:試劑盒已過有效期限。
解決辦法:請更換成仍在有效期限內的試劑盒。
2. 標準曲線線性不佳,或是平行性不好。
a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法: 請確認溫育位置既不透光也不透風(如抽屜內)。
b.原因:操作時間拖太久。
解決辦法:請在方法熟練后再進行操作。
c.原因:微孔間相互污染。
解決辦法: 加樣品時,請小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
d.原因:標準品或酶標記物所加入的量不一致。
解決辦法:請使用已校正過的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。
e.原因:添加樣品或試劑的操作方法不正確。
解決辦法:加樣品或試劑時,吸頭請勿接觸微孔。
f.原因:洗板過程發生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。
解決辦法:請隨時監控洗板機洗板過程,洗完后立即進行下一步驟。
3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
a.原因:室溫太高(>25℃)。
解決辦法: 若無法降低室內溫度,請適當縮短步驟4的溫育時間。
b.原因:底物溶液受到污染。
解決辦法: 若發現底物溶液已呈現淡藍色,請不要再使用。
c.原因:反應時間超過太久。
解決辦法:請控制反應時間。
d.原因:酶標記物污染了盒內其它試劑。
解決辦法:使用過的吸頭應立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過的容器應立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無殘留)


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